毛细管电泳正确的使用至关重要
毛细管电泳在新药研发领域显示出重要的应用前景。CE采用水介质作为实验系统,保证了药物筛选在与生命介质相似的环境中进行,优于其他传统的体外筛选方法。
除了保持所选分子和靶点的生物活性外,CE筛选过程还强调配体和受体之间的相互作用。该电泳药物筛选主要针对与药理学理论相关的重要参数,如结合常数KB、结合速率常数Kon和离解速率常数koff,有利于模拟和预测靶向药物在体内的相互作用过程。
毛细管电泳的正确使用方法如下:
1、仪器预热及毛细管冲洗
打开仪器和支持工作站。当工作温度设为3℃,不加电压时,按1mol/L NaOH溶液5min,二次水5min,1mmol/L nah2po4-na2hpo4 1:1缓冲液5min,冲洗过程中,出口应与废液的位置相一致不应升起支架。
2、混合标准样品的制备
同时测定了标准样品中苯甲酸的浓度。分别为5、1、2、5和1mg/ml。
3、制作标准曲线
毛细管冲洗完毕后,取1ml混合好的标准样品,放在塑料样品管上,放在进样架上的样品位置上,调整出(出)口到缓冲液(缓冲液)上,抬起支架固定,开始进样。注射压力为3mbar,注射时间为5s。注射后,将入口支架的位置改回缓冲溶液,记住要回到缓冲位置!选择方法24CE.mtw公司,修改适当的文件说明,然后开始分析,电压25kV,时间约1min。
4、未知浓度混合样品的测定
方法和条件同上。对未知浓度的样品进行检测,分析时间约为25min,根据苯甲酸钠的标准曲线测定雪碧和醒目饮料中苯甲酸钠的含量。
5、不同缓冲溶液中迁移时间的变化
未知浓度混合样品测定后,按1mol/L NaOH溶液5min,二次水5min,然后将进出口两端缓冲液改为2mmol/L Na2B4O7 5min,在此条件下,将未知浓度的混合样品在25kV电压下测试约1min,按之前的顺序再次冲洗毛细管,并再次更换进出口两端的缓冲液,即1mmol/L nah2po4-na2hpo4,pH值为6,洗涤时间为5min,对未知浓度的混合样品进行测试,电压为25kv,时间约为15min。
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